text: 人病原体结核杆菌（Mtb）需要借助蛋白酶体系统来引发小鼠致死性感染。基于此，来自犹他大学医学院等机构的研究人员合作开展了一项研究（其相关成果于2016年3月21日发表在PNAS上），发现蛋白酶体辅助因子E（PafE，Rv3780）不仅能借助独立于三磷酸腺苷（ATP）的结核杆菌蛋白酶体来激活蛋白质水解，还能促进Mtb的热休克反应及其毒力；PafE亚基能够形成类似于PA26及PA28的独立于真核ATP的蛋白酶体激活剂的四螺旋束。然而，与其它已知的蛋白酶体激活剂不同，PafE形成的是12倍对称性十二聚体，并需要一个在此前描述的激活剂中未曾发现的甘氨酸-XXX-甘氨酸-XXX-甘氨酸基序。有趣的是，截断PafE的羧基末端会使得PafE环与天然蛋白酶体核粒子稳定地结合在一起，并能显着提高蛋白酶体的活性，说明这种辅助因子延伸的羧基末端能够控制PafE与蛋白酶体核粒子的结合。此外，研究数据还表明对于细菌而言，蛋白酶体活化不局限于六聚体ATP酶。
  目的：分析颅脑外伤患者开颅术后颅内感染的相关因素与耐药性，为临床预防提供依据。方法回顾性分析2012年1月－2015年7月宁波市第二医院收治的230例行开颅手术颅脑外伤患者临床资料，探讨颅脑外伤患者开颅术后发生颅内感染的相关因素，并对感染患者进行病原菌培养，分析其耐药性。结果230例颅脑外伤患者术后发生颅内感染24例，感染率10．43％；24例颅内感染患者脑嵴液培养出病原菌24株，其中革兰阳性菌15株占62．50％，革兰阳性菌9株占37．50％；革兰阳性菌对苯唑西林与青霉素的耐药率均较高，分别为93．33％、86．67％，对万古霉素耐药率较低；革兰阴性菌对卡那霉素的耐药率最高，为55．56％；经单因素分析，影响颅脑外伤患者开颅手术后发生颅内感染的相关因素包括手术持续时间、手术次数、手术入路方式、术后切口脑嵴液漏、脑室外引流及术后低蛋白血症等（P＜0．05）；经多因素logistic回归分析显示，颅脑外伤患者手术时间、手术次数、切口脑嵴液漏、脑室外引流是术后发生颅内感染的独立危险因素。结论颅脑外伤患者开颅手术后发生颅内感染由多种因素造成，临床上确诊应依据药敏检查结果，及时调整抗菌药物进行治疗，以尽快控制感染。
  仅有5%至10%的人群在感染结核杆菌之后会发生结核病，但其背后的相关机制仍不清楚。基于此，来自波士顿医疗中心、乌干达马凯雷雷大学、波士顿大学公共卫生学院以及美国国家心脏肺和血液研究所等机构的研究人员合作开展了一项研究。他们前期研究发现与传统的抗酸杆菌（AFB）痰涂片相比，咳嗽产生气溶胶中结核杆菌的菌落形成单位（CFU）能够更好地预测结核感染状况。此次他们假设结核患者的咳嗽唿出气溶胶培养物也许能够预测接触人群的结核发病情况，其相关成果于2016年3月29日发表在ClinicalInfectiousDiseases上。
  研究者们以居住于乌干达首都坎帕拉的85名痰涂片阳性结核病患者及其369名家庭接触者为分析样本，开展了一项回顾性队列研究。他们分别对结核患者及其招募的接触人群进行了标准评估，并对结核患者咳嗽唿出气溶胶中的结核杆菌进行了培养。此外，他们还对接触人群进行了随访以了解其结核发病状况。
  结果显示，在中位时间为3.9年的随访中，8名（2%）接触者发生了结核病；通过校正与未校正分析发现接触人群结核发病与MGIT痰培养结果（OR值为8.2，95%可信区间为1.1-59.2，p=0.04）、暴露于气溶胶中结核杆菌含量高的结核患者（OR值为6.0，95%可信区间为1.4-25.2，p=0.01）、HIV感染（OR值为6.11，95%可信区间为0.89-41.7，p=0.07）之间均存在一定的关联关系；现有数据表明根据痰液与气溶胶样本检测结果能够推出两种相关但有区别的现象。
  综上所述，与气溶胶中结核杆菌含量高的结核患者有过接触的人群发生结核的风险会增加，但后续还需开展前瞻性研究来评估与结核杆菌高含量气溶胶接触对其结核发病风险的影响。
  2016年2月3日，ClinicalandVaccineImmunology在线登载了一项由印度科技大学、新德里国立免疫学研究所、印度班加罗尔M.S.拉迈亚医院等机构的研究人员合作完成的成果，主要是探讨结核杆菌分泌蛋白Rv1860对人多功能性CD8+T细胞的刺激作用。他们通过前期研究发现结核杆菌Rv1860蛋白既能够刺激纯化蛋白衍生物（PPD）阳性健康个体的CD4+和CD8+T细胞分泌γ干扰素（IFN-γ），也能够保护DNA疫苗和表达Rv1860的重组痘病毒免疫豚鼠不受结核杆菌毒力的影响。此次，他们利用一个容纳了覆盖Rv1860全长的32段重叠肽的面板探讨了由CD8+T细胞所支配的结核杆菌潜伏感染健康个体血液中Rv1860特异性多功能T（PFT）细胞应答状况。
  研究发现，结核杆菌潜伏感染健康志愿者体内多个CD8+多功能T细胞亚群数量均显着高于结核患者；结核患者外周血单核细胞（PBMCs）对Rv1860肽的应答受TNF-α和IL-10分泌状况的支配，其中TNF-α主要来源于非T细胞；T细胞对Rv1860的应答模式明显不同于先前以其他人群为样本所研究报道的结核杆菌抗原ESAT-6、CFP-10、Ag85A和Ag85B引起的以CD4+T细胞主导的应答。此外，研究人员还进一步明确了一条覆盖Rv1860蛋白第21至39位氨基酸的肽链。由于该条肽链能够刺激结核杆菌潜伏感染健康志愿者及结核患者体内不同类型的细胞因子特征，因此具备区分结核潜伏感染与其它疾病的潜力。
  综上所述，研究人员指出：携带多功能性CD8+T细胞及其它能够刺激抗原的CD8+T细胞的结核疫苗具备防止结核潜伏感染进展为结核病的潜力。
  营养不良（被定义为BMI值偏低）是发生活动性结核病的一项主要危险因素，然而与这种易感性相关的生物学基础却仍未得到明确。为了验证营养不良是否会影响潜伏结核感染个体的系统性及抗原特异性细胞因子水平，来自印度的7名研究人员合作分析了潜伏结核感染且BMI值偏低个体的循环细胞因子水平及结核抗原诱导的细胞因子水平，并将其与潜伏结核感染但BMI值正常个体相应的细胞因子水平进行了比较，其相关成果于2016年2月10日发表在ClinicalandVaccineImmunology上。
  综上所述，潜伏结核感染并伴有BMI值偏低的特征为保护性细胞因子反应减弱而调节性细胞因子反应增强，为活动性结核病发生风险增加提供了一种潜在的生物学机制。
  结核病的诊断主要依靠痰涂片抗酸染色和结核杆菌（Mtb）培养，但痰涂片敏感度较低而Mtb培养和药敏试验耗时较长，且易延误诊断或漏诊。随着分子生物学诊断技术的不断发展，利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（XpertMtb/RIF）可以在2h内直接从临床样品中检测到结核杆菌复合物（MTBC）与利福平（RIF）耐药性，在多个国家的评估性研究中显示出高度敏感性和特异性，并得到WHO的认可和推荐。基于此，来自浙江省衢州市人民医院的6名研究人员通过对2014年10月至2015年3月在该院就诊的疑似肺结核患者进行连续６个月监测，并对痰液样本同时进行抗酸染色镜检、液体MGIT培养和XpertMtb/RIF检测，评估了XpertMTB/RIF在检测Mtb及其利福平耐药性中的应用效果，其相关成果发表于《中华临床感染病杂志》2016年第9卷第1期。
  研究初期纳入疑似肺结核患者共713例，后因各种原因（XpertMTB/RIF检测失败８例、液体培养污染39例、重复患者12例、诊断不明确2例）有61例患者未得到完整实验结果，故实际纳入统计分析的患者例数为652例。
  结果显示：
  1.参照肺结核诊断标准（WS288-008）、临床表现、胸部影像学及实验室检查，399例确诊为肺结核（男性274例，女性125例，平均年龄为57.1岁）、11例非结核分枝杆菌、242例无结核；XpertMTB/RIF检测阳性151例，其中诊断为肺结核149例、肺癌1例、肺部感染１例；XpertMTB/RIF、痰涂片镜检和MGIT培养检测结核分枝杆菌的敏感度和特异度分别为37.3%（149/399）和99.2%（251/253）、17.0%（68/399）和98.8%（250/253）、37.8%（151/399）和95.6%（242/253）。其中，XpertMTB/RIF检测的敏感度显着高于涂片镜检（χ2＝50.9，P＜0.01），但与MGIT培养相比，差异无统计学意义（χ2＝0.5，P＞0.05）。而三种方法的特异度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；
  2.按涂片镜检和培养结果进行分类，XpertMTB/RIF检测的敏感度分别为98.6%（68/69）（涂阳培阳）、87.9%（73/83）（涂阴培阳）和3.2%％（8/247）（涂阴培阴）。此外，8份XpertMTB/RIF检测阳性但培养和涂片均为阴性样本的平均ct值为28.1；
  3.对XpertMTB/RIF检测和MGIT培养均为阳性的141例进行利福平耐药性检测，其中XpertMTB/RIF检出利福平耐药12例。以液体药敏法为金标准，XpertMTB/RIF检测利福平耐药敏感性为100%（9/9）、特异性为97.3%（129/132）。
  综上所述，XpertMTB/RIF检测痰液中结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性，操作简单，生物危害度小，虽然在检测利福平耐药性方面与参考方法存在一定差异，但其2h就可预测利福平耐药性的特点，相对于需要漫长时间等待Mtb培养和药敏结果来说，对于临床快速诊断和治疗肺结核具有重要意义。
  结核病和HIV感染是引起越南人群患病和死亡的主要原因，但对于TB/HIV合并感染的发病趋势及患者特征的描述尚不完善。基于此，来自悉尼大学玛丽·巴希尔传染病和生物安全研究所、越南HIV/AIDS政府部门、越南国家卫生和流行病学研究所等机构的研究人员以越南国家结核病与HIV感染通报数据为分析样本,描述了两种疾病（包括合并感染）发病人群在越南的地理分布情况及其发病趋势，并比较了结核合并HIV与不合并HIV感染患者的人口学和临床特征，其相关成果于2016年3月29日发表在InternationalJournalofInfectiousDiseases上。
  结果显示，2005至2014年间越南HIV累计发病和死亡数量分别增加了298,151和71,332例，但由于抗逆转录病毒疗法（ART）的引入，使得新的HIV感染和死亡数量均有所下降；2011至2014年间，越南接受常规HIV检测的结核患者数量从58.9%上升至72.5%，且2014年所有被诊断为HIV合并感染的结核患者中，有2803（72.4%）例接受了ART；2011年至2014年间，越南登记接受治疗的多重耐药结核患者数量增长了近3倍（从578到1,532）；2014年，多重耐药结核患者中合并HIV感染的比例（51/1,532;3.3%）与非多重耐药结核患者中合并HIV感染的比例（3,774/100,555;3.8%）相似（OR值为0.77,95%可信区间为0.7–1.2）。
  综上所述，对越南TB/HIV合并感染患者的治疗已显现出持续改善的效果。此外，虽然越南多重耐药结核病例数量上升仍是一个有待解决的问题，但其原因并非是HIV的合并感染。
  潜伏结核感染（LTBI）复发是新发结核病的主要来源，其中耐药结核所占比例较大，使得耐药LTBI复发的防控成为结核病研究的重点。耐药结核杆菌的致病机制、药物和疫苗研究均依赖耐药结核杆菌潜伏-复发感染动物模型及科学的评价体系，但针对该动物模型的研究目前罕有报道。虽然尚无明确证据表明结核杆菌H37Rv与耐药株的潜伏-复发感染动物模型在机制方面存在差异，但在抗耐药结核杆菌药物和治疗性疫苗的评价方面不能完全用H37Rv潜伏-复发感染动物模型替代，且目前H37Rv潜伏-复发感染动物模型还存在一定的缺陷，例如小鼠模型的潜伏期荷菌量偏高、复发期变异大，猴模型的潜伏期和复发期不可预测等。
  基于此，来自中国医学科学院医学实验动物研究所以及中国食品药品检定研究院结核疫苗室的5位研究人员合作对耐药结核分枝杆菌潜伏-复发感染动物模型及评价体系进行了分析和展望，主要包括耐药结核杆菌潜伏-复发感染动物模型的研究现状、耐药结核杆菌潜伏-复发感染动物模型研究可能存在的问题及解决思路两个方面的内容，其相关成果发表于《微生物与感染》2016年第11卷第1期。
  在研究现状部分，研究者首先阐述了开展耐药结核杆菌感染动物模型研究的必要性以及结核杆菌潜伏感染理想动物模型应具备的特点，然后描述了常见结核杆菌潜伏-复发感染动物模型在研究中的应用情况，并以列表形式对不同结核杆菌潜伏-复发感染动物模型的优缺点进行了比较。此外，研究人员指出导致结核杆菌潜伏-复发感染动物模型应用受限的主要原因为缺乏用于预测复发的免疫学指标。
  在存在问题及解决思路部分，研究人员指出目前制备耐药结核杆菌潜伏-复发感染动物模型存在的主要问题为：（1）缺乏有代表性的标准耐药结核杆菌菌株；（2）耐药结核杆菌潜伏-复发感染动物模型可能不稳定，并提出两点解决思路：（1）微卡（母牛分枝杆菌提取物）联合化学药物可能使制备的耐药结核杆菌潜伏-复发感染小鼠和猴模型稳定可控；（2）在耐药LTBI模型中筛选早期预测复发的免疫学指标。
  综上所述，采用新的抑制剂和模型制备参数，有望制备较为稳定且可控的耐药结核杆菌潜伏-复发感染动物模型，进而可探索预测复发的免疫学指标以提升模型在药效学评价中的应用价值。此外，该模型的创制还将促进耐药结核杆菌致病机制、药物及疫苗候选靶标的研究，促进药物和疫苗的转化医学研究，给耐药结核病的防控带来新的希望。
  研究将所有患者随机分为对照组48例和治疗组57例，并均给予利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇联合全身化疗2周以上，之后对照组继续给予上述全身化疗方案，治疗组则在全身化疗基础上给予局部冷冻治疗（具体治疗方法或过程见全文）。在此期间，两组患者均可给予相应对症支持治疗，并观察及比较两组患者1个月后的治疗总有效率、气促评分及并发症情况，其中总有效率为[（显效例数+有效例数）/总病例数]×100%；气促评分按照美国胸科协会的气促评级标准进行评级。
  结果显示，经过1个月的治疗，冷冻治疗组总有效率（91.23%）明显好于对照组（71.91%）；治疗前两组患者多数伴有不同程度的气促表现，气促评分相近（治疗组1.46±1.02vs对照组1.54±1.01），差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后两组患者气促症状均较前明显改善，且治疗组气促评分（0.91±0.41）与对照组（1.02±0.57）相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。此外，两组患者在治疗过程中均未出现明显的气胸、大出血、脓胸、心脏骤停等严重并发症。
  综上所述，全身抗结核治疗联合支气管镜下冷冻治疗溃疡型及肉芽结节型支气管结核的效果明显，且安全、可靠、并发症少，患者症状改善明显，因而值得在临床中推广应用。
  当前用于治疗耐多药结核（MDR-TB）的抗结核药物数量不足。其中复方新诺明是一种可用药物，已成为治疗TB-HIV合并感染患者的常规药物。然而，有关复方新诺明用于治疗结核患者的药动学（PK）和药效学（PD）参数方面的数据还很有限。基于此，来自荷兰格罗宁根大学医学中心（UMCG）、荷兰国家公共卫生和环境研究院（RIVM）以及荷兰奈梅亨大学医学中心等机构的研究人员合作评价了复方新诺明的有效成分——磺胺甲恶唑的PK参数和体外PD方面的数据，其相关成果于2016年4月11日发表在AntimicrobialAgentsandChemotherapy上。
  研究人员以12名18岁以上的药物敏感性结核患者为分析样本，开展了一项前瞻性药动学研究，具体为给予患者每日一次口服复方新诺明960mg，并采用Mw£harm3.81建立群体药代动力学一室模型，用于计算ƒAUC/MIC比值以及游离药物浓度超过MIC的时间（T>MIC）。
  综上所述，研究所得的PK和PD相关数据可用于进一步明确治疗耐多药结核病的复方新诺明给药方案。