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  食品微生物学实验指导
  实验一环境中微生物的检测
  了解环境中微生物的存生,初步建立从事微生物工作者必须具有的“无菌”概
  念,并认识微生物细胞的群体结构-菌落
  微生物个体微小,种类繁多且无处不有,但肉眼不可见。
  若用营养琼脂平板法
  进行检测,即可看到细胞繁殖后的群体结构,即菌落。
  不同的微生物形成的菌落性
  状不同,它是认识和鉴别各种微生和的依据之一。
  一般细菌在肉汁营养琼脂上的菌落形态,可从形状、大小、色泽、光泽、隆起
  度、透明度、表面光滑或粗糙、边缘整齐或不规则等特征加以区别。
  牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基 5 副(供 4 人用)。
  “CK”字样(对照),但不许打开皿盖。
  2.处理操作打开皿盖按下列方法各自进行操作:
  (1)在桌面上,使平板培养基于空气中暴露 5~10min,盖上皿盖。
  (3)口对平板培养基咳嗽几下,盖上皿盖。
  4.检查取出培养皿,仔细观察各皿中的菌落形态,并统计出每皿菌落数。
  表 1-1 环境中微生物检测结果
  菌落各数优势类群菌落特征(选典型代表描述)
  (个/皿) 形状大小(mm) 色泽光泽高度透明度边缘状况表面状况
  *注:菌落特征描述
  1.形状:园状、丝状、不远见则状、假根状。
  1.各处理皿的菌落性状有何异同
  2.环境中微生物检测结果说明什么问题
  实验二细菌运动性的观察
  学***水浸片和悬滴标本片的制作方法,观察细菌的运动。
  幼龄菌活泼,
  老龄菌运动性差或失去鞭毛不能运动,观察功菌的运动常采用水浸片或悬滴标本片。
  在显微镜下观察时,应减弱光照强度,并注意区分是细菌的真运动,还是因液体流动
  引起细菌随水流而动,或呈现无规则、原位颤动的布朗运动。
  1.菌种培养 24~36h 的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌悬液或枯草水(枯
  2.器材凹室载玻片,载玻片,盖玻片,滴管,蒸镏水,吸水纸,擦镜纸,显
  微镜,双层瓶。
  (一)水浸片法
  1.制片用滴管取菌悬液(枯草水或陈尿液)一小滴,置于干净的载玻片中央,
  以倾斜法加上盖玻片(勿使产生气泡)。
  2.镜检将载玻片置显微镜下,用低倍镜、高倍镜观察细菌运动的情况。
  (二)悬滴法
  1.制片取凹室载玻片一张,于凹室周围涂一圈水膜;取干净的盖玻片一张,
  于中央滴一小滴菌悬液,小心而迅速的翻转盖玻片,使菌液保留园形水珠状。
  将盖玻
  片轻放于凹室的上面,使液滴空悬于室内,稍压,使盖玻片边缘与水膜密接,以减少
  菌液蒸发(图 1-15)。
  2.镜检标本片置于显微镜下,用低倍镜、高倍镜观察。
  绘出你观察的细菌运动位移轨迹示意图。
  1.显微镜下观察细菌运动时,为何应减弱光线
  2.细菌的运动布郎运动有何区别
  实验三显微镜的使用和细菌形态的观察
  学***并掌握显微镜油镜的使用技术及维护的基本知识。
  使用油镜观察细菌的几
  种基本形态。
  用悬滴法在高倍镜或油镜下观察细菌的运动。
  显微镜油镜使用的原理。
  1.光学部分:接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等).
  它使检视物放大,造成物象.
  2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节
  器、细调节器等部件.它起着支持调节固定等作用。
  普通光学显微镜的放大倍数和分辨率
  1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数
  2.显微镜的分辨率是表示显微镜辨析物体(两端)两点之间距离的能力,可用
  式中 D:物镜分辨出物体两点间的最短距离。
  物镜和被检标本间介质的折射率。
  α:镜口角(即入射角)。
  普通光学显微镜油镜使用的原理:油镜,即油浸接物镜。
  当光线由反光镜通过玻
  片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,
  降低了视野的照明度。
  若中间的介质是一层油(其折射率与玻片的相近),则几乎不
  发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。
  显微镜(显微镜灯)、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸等。
  细菌三种形态的染
  1.用前检查:零件是否齐全,镜头是否清洁。
  2.调节光亮度
  3.低倍镜观察:粗调、细调
  4.依次再进行中倍、高倍观察
  5.油镜观察:高倍镜下找到清晰的物象后,提升聚光镜,在标本中央滴一滴香
  柏油,使油镜镜头浸入香柏油中,细调至看清物象为止。
  6.换片:另换新片,必须从第三条开始操作。
  7.用后复原:观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去镜头上的油,然后再用擦
  镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油,最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯,后将镜体全部
  当目视接目镜时,
  特别在使用油镜时,切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面。
  4.观察时,两眼睁开,养成两眼能够轮换观察的***惯,以免眼睛疲劳,并且能
  够在左眼观察时,右眼注视绘图。
  6.显微镜应存放在阴凉干燥处,以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片。