text: 分子印迹技术与中药研究
  512 由于古代认识所限,致使石韦属Pyrrosis多个种使用,同名异物及同物异名较为普遍。
  目前,商品较复杂,民间药用混乱,正是历史使用习惯的反映和延续。
  513 石韦的药用部位是叶,目前有的文献将其归于全草类中药是不妥当的,应归于叶类中药。
  由于其具有预定性、识别性和实用性的优点,分子印迹聚合物已广泛应用于生物工程、临床医学、环境监测及食品工业等众多领域,在分离提纯、免疫分析、酶模型以及生物模拟传感器等许多方面显示出良好的应用前景,引起了人们的广泛关注。
  笔者综述了近年来该技术在中药研究方面的应用。
  3通讯作者:崔元璐, cuiyl
  分子印迹的概念来源于人们对抗体2抗原及酶2底物专一性的认识,著名的诺贝尔奖获得者Pauling最早提出以抗原为模板来合成抗体的设想。
  1993年Mosbach等在Nature上发表了关于制备支气管扩张药茶碱和安神药安定的分子印迹聚合物,并将其用于抗体和受体模拟物的报道后,分子印迹技术便成为国内外研究热点〔1〕。
  分子印迹聚合物(molecular imprinted polymers,M IPs)是一类具有复杂网状结构、在三维空间构象和结合位点上与某一特定分子(模板分子、印迹分子)完全互补的网络聚合物,其结合位点是通过在聚合物合成中添加模板分子来形成。
  它是在聚合反应过程中,功能化聚合物单体通过共价或非共价键与模板分子结合,反应完成后将模板分子洗脱出来,形成的一种具有固定空穴大小和形状及有确定排列功能团的交联高聚物。
  这种分子印迹聚合物对印记分子的立体结构具有记忆功能,在进行混合物的分离时具有高度选择性。
  从本质上讲分子印迹聚合物在分子印迹过程中产生的识别位点常常依靠空间结构及离子、氢键和金属配位等作用力选择性地结合模板分子,但对分子识别的机理目前还缺乏定量和系统的研究〔2〕。
  由于具有构效预定性、特异识别性和广泛实用性等特点,M IPs在对映体和异构体的分离、固相萃取、化学仿生传感器、模拟酶催化、临床药物分析、膜分离技术和药物开发等领域显示出广泛的应用前景〔325〕。
  近年来,M IPs在中药方面的应用也已初步展开。
  其所 616 中药材 Journal of ChineseMedicinalMaterials 含的成分非常复杂,包括有效成分、无效成分,还有毒性成分。
  为了提高中药的疗效,减低毒副作用,提高中药制剂的内在质量,选用合理的提取分离技术是非常重要的。
  中药有效成分的分离与纯化是中药开发的关键。
  其最大的特点是分子识别性强,选择性高,成本低,而且制得的M IPs有高度的交联性,不易变形,有良好的机械性能和较长的使用寿命。
  这无疑是一种高效的中药有效成分分离技术〔6〕。
  111 用于有机酸类化合物的分离纯化 KarasovaG等用原儿茶酸作印迹分子合成M IPs用于蜜蜂花属植物天门冬中活性成分的分离提取。
  结果分离得到原儿茶酸、对羟基苯甲酸(即对羟基安息香酸)、香草酸、丁香酸等有机酸类化合物,回收率可达到5613%8211%〔7〕。
  朱秀芳等以氧化阿魏酸为假模板分子通过自组装技术在乙腈中制备了对阿魏酸具有良好识别能力的M IPs。
  研究表明,该聚合物对阿魏酸的识别能力甚至高于氧化阿魏酸;对川芎水提液中阿魏酸进行提取分离,获得较好结果,显示该聚合物具有直接作为阿魏酸分离提取材料的潜能〔8〕。
  Lai JP等以苦参碱为模板制作了分子印迹微球,从槐属植物苦参中提取分离苦参碱。
  结果分子印迹微球对苦参碱的回收率可达到7114% ,并提示其可用于大规模分离提取中药有效成分〔10〕。
  黄淑芳等以茶碱为模板分子,采用顺序聚合法合成了M IPs。
  结果表明制备的M IPs对印迹分子茶碱具有较好吸附作用,且能保持第一网的树脂粒径。
  113 用于黄酮类化合物的分离 Xie J等用槲皮素为模板合成M IPs,用于银杏叶中槲皮素及其结构类似物的分离。
  周力等将M IT用于中药沙棘中活性成分的提取。
  他们以槲皮素作为印迹分子,从沙棘粗提物中分离提取得到槲皮素和异鼠李素两种黄酮类物质〔13〕。
  静态吸附实验表明M IPs可通过氢键和空间匹配实现对葛根素的选择性吸附; Scatchard分析表明M IPs具有两类不同的结合位点;将其用于葛根提取物的分离,可有效地从葛根提取物中分离出葛根素、大豆苷元和大豆苷,并且所得产品中葛根素纯度为78% ,收率为83% ,远要高于普通大孔吸附树脂对葛根提取液的分离结果〔14〕。
  114 其他 Hu SG等结合M IT和固相萃取技术,从中药秦皮中提取七叶亭(esculetin, 6, 72二羟基香豆素)。
  结果将七叶亭和其类似物七叶灵(escu2lin)、香豆精(coumarin)和瑞香内酯(daphnetin, 7, 82二羟基香豆素)从秦皮中分离出来,并推测所使用的M IPs中可能有两个识别部位〔17〕。
  向海艳等以白藜芦醇为模板分子合成了对天然活性物质白藜芦醇具有较好选择性的M IPs。
  静态平衡结合法以及Scatchard分析法研究表明,该印迹聚合物中形成了两类不同的结合位点,对白藜芦醇有较高的吸附性能和选择性。
  它常常与固相萃取技术、液相色谱技术、毛细管电色谱技术、毛细管区带电泳技术等结合起来用于中药成分的分析。
  这种方法的选择性高,大大减少了检测前样品的纯化步骤,提高了分析效率,扩大了分析范围。
  211 用于分析样品的前处理 M IPs常常作为固相萃取的吸附填料,用于分析样品的分离和富集。
  由于M IPs可以选择性地同混合物中的某一种或某一组结构相似的化合物结合,故非常适合用作固相萃取剂来分离富集复杂样品中的痕量分析物。
  近年来M IPs在固相萃取中的应用与日俱增,同传统的固相萃取相比,可以简化萃取过程。
  另外这种聚合物既可在有机溶剂中使用,又可在水溶液中使用,显示出独特的优点。
  给老鼠服用银杏水浸提物后,将其用于分离纯化老鼠血浆中的槲皮素〔19〕。
  The2odoridis G等用莨菪碱作印迹分子,分析了人和牛的尿液及血清中的东莨菪碱,回收率可达到79%〔20〕。
  212 用于高效液相色谱 M IPs作为固定相用于高效液相色谱是其基本应用之一。