text: 南京药科:肿瘤微环境特异性激活双抗--PAPB
  靶向激活CD3的双特异抗体在实体瘤中的疗效一直以来没有取得突破，其中一个主要的原因是On-Target off-tumor效应，为了解决该问题，很多研究者开发了在肿瘤微环境中特异性激活的抗体，这些抗体可以利用肿瘤微环境的特点如低PH等，将抗体特异性激活并发挥相关作用。近日，南京药科大学利用遮蔽型多肽，开发了肿瘤微环境特异性激活的双特异抗体平台PAPB：Protease-ctivated STAGylated iTE。1PAPB的组成PAPB主要由4部分构成：1）能够起遮蔽作用的多肽PSTAG（shielding polypeptide domain），其主要作用是在非肿瘤环境中遮蔽抗体的结合表位，从而使得抗体无法结合相应的抗原，另外，该多肽由于是较长的无序型多肽，因此在一定程度上可以延长抗体的半衰期；2）MMP2切割Linker： PLGLAG，其可以在MMP2酶的作用下被特异性切割，从而可以释放和linker相连接的PSTAG；3）靶向结合PD-L1的scFv抗体，其可以结合表达PD-L1的肿瘤细胞；4）靶向结合CD3的scFv，其可以结合CD3并激活T细胞。静脉给药后，在正常组织中，因为MMP2酶较少或者缺少，PAPB中的抗体结合位点被其自身的多肽PSTAG遮挡，因此无法结合相关抗原。当PAPB进入肿瘤后，在肿瘤微环境中含有较多的MMP2酶，这些酶可以切割特异性底物PLGLAG linker，从而将多肽PSTAG去除，从而暴露双抗的结合结构域并与相关抗原结合，并激活T细胞对肿瘤细胞进行杀伤。另外，由于PAPB中有PSTAG，因此，与已经上市的BiTE相比，其具有更长的半衰期。2体外活性在体外的细胞结合研究中，PAPB在没有酶切时，其与细胞表面的PD-L1或者T细胞表面的CD3的结合能力相较于BiTE核心都很大程度的降低，这也从侧面证明，该设计可以有效的遮蔽抗体对抗原的结合（下图B和F）。而当PAPB和相关酶短时间孵育后，抗体结合抗原的表位可以暴露，并对相关抗原具有较强的结合（下图A和F）。在抗体体外活性研究中，在PBMC存在的条件下，PAPB和分泌MMP2的A375孵育后，其可以有效的促进肿瘤细胞A375的凋亡，疗效和BiTE相当（下图A），作为对照，没有PD-L1和MMP2表达的HEK293，没有相关凋亡信号。另外，。3安全性安全性方面，在PD-L1低表达的L02细胞中，与BiTE相比，PAPB无法诱导L02的凋亡，并且其无法有效的激活T细胞，因此PAPB只有在肿瘤细胞高表达PD-L1时才具有活力，这也从侧面表面，PAPB可能会具有较好的安全性。在小鼠体内，静脉注射给药后P，而。4体内药效在体内药效中，在相同剂量下（PAPB：0.5 mg/kg, 每3天给药) ；BiTE ：0.5 mg/kg, 每天给药），PAPB与对照组的BiTE相比，更能有效的抑制肿瘤的生长，而且其机会不会导致小鼠体重的下降，因此更安全有效。5总结PAPB在构建中使用多肽对抗体的表位进行遮挡，并利用酶切使其在肿瘤微环境中特异性激活，其不仅具有较长的半衰期，而且理论上可有有效的降低传统的T细胞激活型双抗的On-Target off-Tumor效应。在国外Amunix也开发了类似的双抗，并且在去年被赛诺菲收购《》。👉👉“有这样一个公益健康咨询平台你知道吗？万名星医大型义诊， 每日直播 在线答疑👉“名医走基层--志愿服务行”中国好医生、中国好护士志愿服务总队成立👉ChatGPT的横空出世，会取代医生吗？戳“阅读原文”下载智连星医APP