text: 深度解析肿瘤精准细胞免疫治疗!
  精准医疗(Precisionmedicine)作为一种全新的医学概念与医疗模式，已日益在恶性肿瘤临床治疗中显示其价值。
  相对于其它精准医疗治疗方式，精准细胞免疫治疗具有独特的比较优势，有望成为中国肿瘤精准医疗的重要突破口。
  自2015年1月20日，美国总统奥巴马高调宣布启动精准医疗计划(PrecisionMedicineInitiative)以来，全球范围内掀起一股精准医疗热。
  精准医疗是肿瘤临床治疗的大势所趋
  2011年，在“人类基因组计划”完成近10年后，这一概念由美国著名基因组学家MaynardV.Olson博士在其参与起草的美国国家智库报告《走向精准医疗》中首次提出。
  精准医疗模式集合了诸多现代医学科技发展的知识与技术体系，体现了医学科学发展趋势，也代表了临床实践发展的方向，将带来一场新的医疗革命并将深刻影响未来医疗模式。
  众所周知，肿瘤本质上是一种由一系列基因变异的积累导致的复杂遗传疾病，这意味着肿瘤的基因组是动态变化的、且存在高度异质性，不同的疾病进展阶段以及不同的肿瘤细胞可能携带不同的变异信息，从而对以大规模人群为基础开发和测试药物的治疗模式构成颠覆性挑战。
  据一项覆盖了9个国家和地区，1217例病人的泛亚洲科研显示:没有基因检测鉴定相关的靶标却接受了靶向治疗，死亡风险将增加185%。
  在具体操作中，肿瘤精准医疗通常可划分为以下三部曲:基因检测、大数据分析和用药指导。
  第一步，基因检测是患者变异信息的获知过程，如通过高通量测序方法获得肿瘤单核苷酸有义突变、拷贝数变异、基因移位和融合基因等海量基因变异信息，该环节相关检测技术的精确性及所检测对象(如肿瘤组织标本)所反映信息的全面性是关键。
  第二步，大数据分析是相关变异信息的解码与提炼过程，即从海量的组学数据中抽丝剥茧、去粗存精，提取有价值信息，发挥前后两个环节之间承上启下的作用，该环节相应分析模型与分析方法的精确性是关键;
  候选药物可涵盖所有类型恶性肿瘤临床用药，甚至用于其它疾病治疗的药物。
  精准医疗直指恶性肿瘤临床治疗的软肋，其好处不言而喻，已在临床治疗中越来越显现其价值。
  精准细胞免疫治疗是肿瘤精准医疗的重要突破口
  而且，免疫细胞来源于患者自体，作为一种“活的药物”，具有自主性与自我适应能力，能有效缩短开发时间。
  因而，精准细胞免疫治疗(PrecisionCellImmunotherapy,PCIT)有望成为肿瘤精准医疗的一个重要突破口。
  我们定义的精准细胞免疫治疗是通过高通量基因测序及大数据分析，获得针对癌细胞特异性新抗原(Neo-antigens)具有高效应的精准T细胞(PrecisionTcellforNeoantigen，我们简称为PNA-T)，富集PNA-T细胞对肿瘤患者进行精准免疫治疗。
  涉及的步骤包括(见图1):
  精准细胞免疫治疗的大致流程
  *CTC:循环肿瘤细胞(circulatingtumorcell，CTC);ctDNA:循环肿瘤DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA);MHC:主要组织相容性复合体(majorhistocompatibilitycomplex,MHC);PNA-T:新抗原特异性精准T细胞(PrecisionTcellforNeoantigen)
  1.基因检测:高通量基因检测手段获取患者的癌细胞特有的基因变异信息(包括突变、融合基因等)，从中筛选出能高效激活免疫反应的肿瘤特异性抗原--新抗原(neo-antigens)，这种新抗原可以来自细胞核、细胞质、细胞膜任何位置;
  2.免疫靶点的筛选:根据患者的主要组织相容性复合体(majorhistocompatibilitycomplex,MHC)分型，寻找能引发强烈免疫的新表位(neo-epitopes);
  3.寻找并富集针对新抗原表位的PNA-T细胞:主要通过负载新表位的树突状细胞(Dendriticcells,DC)刺激、标记后的MHC-新表位耦联体流式/磁珠分选富集PNA-T细胞或克隆PNA-T细胞的TCR基因，通过转基因修饰手段快速获得转基因PNA-T细胞;
  三代免疫细胞治疗技术的比较
  2014年，Rosenberg团队将该方法成功应用到临床，他们通过高深度外显子测序技术、免疫反应功能验证，筛选出一位转移性胆管癌患者的高频突变基因，并鉴定到其对应的TIL克隆，通过大量扩增该TIL克隆并实施回输治疗，使患者的病情得到有效控制。
  2014年底，另一个研究团队联合应用外显子测序技术、转录组测序技术、高通量蛋白质谱分析技术，及MHC分子-抗原表位亲和力模拟预测技术，寻找到能被T细胞识别从而高效激活免疫反应的多肽 疫苗 ，该个性化肿瘤疫苗兼具预防性疫苗与治疗性疫苗的效能。
  肿瘤精准细胞免疫治疗面临的技术难点
  1)方便快速地获取肿瘤患者的基因组变异信息
  然而，如何获取高纯度的CTC细胞并进行基因测序，以及如何在外周血巨大噪音背景的情况下准确检测ctDNA是一项具有挑战的工作。
  2)快速准确地筛选免疫细胞治疗的适合靶点
  因而，预测MHC分子与抗原的亲和力是该环节的关键要素。
  可以预想，如果通过技术进步以及抗原表位-TCR配对大数据的积累，能最终实现针对特定抗原表位，快速的鉴别出哪些T细胞携带的TCR基因能对其有效识别并发挥治疗作用，那么将大大缩短肿瘤免疫治疗的开发进程，为患者的治疗赢得宝贵的时间，并可以通过测序或数字PCR等手段检测体内这一群或者单个PNA-T细胞的克隆增殖情况，实时监测治疗的获益情况。
  3个策略可供选择:
  通过在体外合成HLA-抗原肽四聚体(HLA-peptidetetramer)能够有效的被特异性T细胞识别，配合流式细胞分选仪，可以从淋巴细胞中分选出抗原特异性的T细胞克隆，再通过成熟的T细胞培养方案可大量扩增相应的T细胞克隆。
  6)增强精准细胞免疫治疗体内疗效的辅助技术
  相对于体外培养条件，肿瘤部位存在抑制免疫的微环境。
  精准细胞免疫治疗与CAR-T技术的所采用的效应细胞均是患者自体的T淋巴细胞，不同之处在于所针对的靶点类型差异:精准细胞免疫治疗瞄准的是患者特有的新抗原(即肿瘤特异性抗原)，这些新抗原与MHC分子结合形成MHC-抗原复合物被提呈到细胞表面，在被提呈前，这些抗原可以分布在细胞各个位置，包括细胞核、细胞质、细胞膜上，可选择范围更广。
  而相对于其它基因检测指导下的个性化治疗方式，精准细胞作为一种“活的药物”，为快速制定针对特定新抗原表位的治疗方式提供足够的广度与可行性。